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我校生命科學(xué)學(xué)院王玉炯、李勇、郭慧琛團(tuán)隊(duì)成功建立基于兔單抗的雙抗體夾心ELISA檢測(cè)方法助力牛皰疹病毒1型防控

發(fā)表時(shí)間:2025-06-11
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【寧夏大學(xué)新聞中心訊 生命與食品學(xué)部】牛皰疹病毒1型(BHV-1)是一種對(duì)全球養(yǎng)牛業(yè)危害極大的高傳染性病毒,可引發(fā)牛的呼吸道和生殖系統(tǒng)多種疾病,導(dǎo)致巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此,牛皰疹病毒1型的快速、準(zhǔn)確檢測(cè)對(duì)于該病的預(yù)防和控制尤為重要。近日,我校生命科學(xué)學(xué)院王玉炯、李勇、郭慧琛團(tuán)隊(duì)在中國(guó)科學(xué)院1區(qū)top期刊《International Journal of Biological Macromolecules》(2025 IF: 7.7)發(fā)表了題為“Double antibody sandwich ELISA based on rabbit monoclonal antibody targeting gD protein for the detection of bovine herpesvirus 1”的研究論文,成功構(gòu)建了一種基于兔單抗的雙抗體夾心ELISA檢測(cè)方法,為牛皰疹病毒1型的精準(zhǔn)檢測(cè)提供了新的工具。

該研究以牛皰疹病毒1型的gD蛋白為靶點(diǎn),構(gòu)建了一個(gè)容量為7.14×1010cfu/mL的兔源單鏈片段變量(scFv)噬菌體展示庫(kù)。通過(guò)三輪生物淘選,獲得了三種高親和力的scFv,并利用CHO-K1細(xì)胞表達(dá)出三種高親和力的兔單克隆抗體?;贒3為捕獲抗體、D2為檢測(cè)抗體,成功建立了雙抗體夾心ELISA方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在3% BSA封閉、抗原孵育90分鐘、顯色15分鐘的條件下,該方法對(duì)牛皰疹病毒1型具有良好的特異性和穩(wěn)定性,與其他牛相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。同時(shí),該方法的批內(nèi)和批間變異系數(shù)均低于5%,具有良好的穩(wěn)定性和可靠性。

該研究首次將兔單抗應(yīng)用于牛皰疹病毒1型的檢測(cè)方法開(kāi)發(fā),相較于傳統(tǒng)的鼠源單抗和兔單抗具有更高的特異性和親和力,能夠有效提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性。這一成果不僅為牛皰疹病毒1型的流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和預(yù)防提供了重要的技術(shù)支持,也為病毒相關(guān)診斷試劑的研發(fā)提供了新的思路和方法。該方法的建立為寧夏奶牛和肉牛產(chǎn)業(yè)的疾病防控和健康養(yǎng)殖提供了重要的技術(shù)支撐。

該研究得到了國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目和寧夏回族自治區(qū)重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目的資助。我校西部特色生物資源保護(hù)與利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室博士研究生劉強(qiáng)是本研究論文的第一作者,生命科學(xué)學(xué)院王玉炯、李勇,郭慧琛為共同通訊作者。

原文鏈接:https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39929469/

(編輯:王文娣)

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